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GFPについて
- GFPの発見と単離について調査すると、Dr. Douglas PrasherとDr. Tsujiがオワンクラゲからgfp遺伝子をクローニングしたことがわかりました。
- 二つのGFPを比較してみると、塩基数と数個のアミノ酸に違いがあります。これはオワンクラゲに二つのgfp遺伝子が存在する可能性があるか、単にシークエンシングのミスかは不明です。
- 現在のタンパク局在解析に使用されているGFPは、どちらのGFPが元となっているかについては特定できませんが、細菌に使用されているGFPについて特に知見はありません。
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ルシフェラーゼとGFPについて。 下の問題がわかりません。 どなたか、解答をお願いできませんか? 問、イネまたはマウスの遺伝子が、転写される組織が明らかになったあとで、その組織における転写の日周性について定量的に調べる実験を行う。GFPまたはルシフェラーゼのうちどちらを利用するほうがよいか、理由と共に説明せよ。 なお、レポーター遺伝子のmRNAとその産物(タンパク質)の半減期はこの実験の目的にとって十分に短く同じ長さであるとする。 この問題に聞かれているような両レポーター遺伝子の差がわかりません。 実験の本を読むと、レポーター遺伝子として、ルシフェラーゼは転写、GFPはタンパク質の局在などを調べる際に使われているようなのですが、なぜそのような使い分けをされているのでしょう? GFPはタンパク質にまで翻訳されないと光らないから、という人もいましたが、ルシフェラーゼだって酵素として働かないと発光しませんよね? GFPは細胞を生かしたまま光らせることができる、ルシフェラーゼは感度が高く生体への毒性が低いなどは書いてあったのですが、イマイチすっきりしません。
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