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凍結切片に穴ができる
脳の凍結切片を作成して免疫染色を行ったのですが、切片に細かな穴がたくさん開いていて見栄えがとても悪いです。どこが悪かったのでしょうか？ 作成方法は、４％PFAで灌流固定後、全脳を４℃で後固定O/N ３０％スクロース/PBSに置換して４℃、O/N（沈むまで） OCT Compoundで包理後、ドライアイスで急速凍結して-80℃保存 使用時に-20℃で安定化後、切片作成しました。 切片に穴があく場合、どこを直すor改善すればよいのでしょうか。 よろしくお願いします。
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確かに改善が見られました！ありがとうございます！