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3T3L-1への遺伝子導入 (Lipofectamine 2000 or LTX)
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- Dr_Hyper
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遺伝子導入効率が悪いのもありますが、CMVのpromoterが動きにくい細胞でもあります。そのためGFPの蛍光が観察しにくいために、より遺伝子導入効率が悪いと思いがちです。他の会社の製品でNIH3T3細胞への導入効率が良いといっている遺伝子導入試薬もいくつかありますので(3T3-L1もこの条件に関してはほぼ同一です)、そちらを試すか、試薬、DNAの量をもう少し条件検討して(増やすしかないですが)、その後薬剤耐性を利用して遺伝子導入された細胞のみ培養を続けるなどの工夫が可能かと思います。また細胞がdish上でいっぱいいっぱいだと、この細胞は増殖を止めてしまいますので細胞の撒き方も重要な実験条件のひとつです。
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