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吸光度の対照波長ってなんですか
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- haguro_tonbo
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私も細胞毒性をチェックする場合、MTT assayを利用しております。 対照波長の件ですが、必ずしも測定する必要はありません。 MTT assayの場合、対照波長を600～630nmに合わせるのが一般的ですが、その範囲の波長において試薬の吸収がない事を表しています。 試料の濁り等の非特異的吸収を確認することができます。 濁りは測定値に影響を与えますので、対照波長から全体的な濁りを確認し、測定値から差し引いて下さい。 試料によってはほとんど濁りの無いものや、多少の濁りは気にしない場合もあるかと思いますので、実験系にあわせて測定して下さい。 それからブランクの件ですが、 私は細胞＋培地を対照波長で測定し、細胞自体の濁りなどを確認しています。 またそれ以外のブランクとしては、 培地＋試薬を測定波長で測定し、培地と試薬の誤発色がないかを確認する方法があります。 ご自身の実験系に合わせて使い分けてみて下さい。
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お礼
大変わかりやすいご回答ありがとうございました。たすかりました。このメールを参考に1度測定いたします。ありがとうございましたm(__)m