【至急】 HPLC濃度計算

質問

HPLCでアルカロイドの測定をしました。

保持時間とピーク面積を使って濃度を計算する方法を教えてほしいです。

お願いします。

回答No.2

ryumu

ちなみに、検出は何で行っていますか？
吸光度を検出しているなら、以下の条件を満たしていれば、ランベルト・ベールの法則から濃度が計算出来るかも知れません。

１）算出に使うピークが、目的物質だけの吸収によるものであること
２）検出波長における吸光係数が分かっていること
３）検出器中の光路長が分かっていること

どうでしょうか？

回答No.1

ryumu

保持時間とピーク面積だけでは、濃度は出ないはずです。
同じ条件でカラムにかけた、濃度既知の基準物質とのピーク強度、より厳密には、分離度の異なる内部標準物質と共に試料をカラムにかけ、その目的物質と内部標準物質のピーク面積強度比を使って、検量線を作成して計算するはずです。

補足

回答ありがとうございます。

標品が手に入るのに時間がかかってしまうので、とりあえず、正確ではなくても大体の濃度を把握したいなと思ったのですが…。
基準となるものがないと濃度は出ないのですね。